你所不知道的CAR-T细胞治疗“套”路(中)
细胞治疗的基本概念在前两期已经有了一个概况给大家了。对于制备CAR-T 细胞来说,其实我们大可以把它分成两块。一块是病毒,一块是细胞。之前已经了解过,CAR-T细胞就是一种拥有人工受体的超强力T细胞,可以快速捕杀癌细胞。
但我们改造普通T细胞的话,仍然需要依托于我们的工具——病毒。
这里的病毒其实不是常常让我们生病的病原体,而是一种基因工程载体。打个比方来说,那就是一台卡车,把我们想要的“货物运送到细胞里面。其次,病毒作为“卡车”,有着它的优势。因为它是寄生生命,所以它会天生有找宿主的特性,可以迅速找到我们需要改造的细胞。
既然说到了卡车,那就必须有它相应的货物。那这个货物到底是什么?对!就是DNA,而且是带人工受体对应基因的DNA片段。DNA进入细胞之后就会生产相应的人工受体,让T细胞变强。
在CAR-T的流程里,首先,我们采用的病毒是慢病毒。慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息,是慢病毒载体系统的主要组成部分。
那么问题来了,到底怎么样把“货物”装载到“卡车”里?
图片来源:www.thermofisher.com
在生产研究上,首先,使用基因编辑技术把CAR-T人工受体DNA序列剪切黏贴到慢病毒载体上。而后常常会把慢病毒载体Lentivius vector以分子生物学方法导入到293T宿主细胞里面。在宿主细胞内,病毒载体会利用宿主体内的细胞功能生产复制出自己的RNA跟蛋白质外壳。合成后以萌芽的方式离开细胞。收集细胞培养液即可得到相应的改造后的慢病毒。
在CAR-T细胞治疗上,病毒的改造十分重要。因为病毒的改造会直接影响到CAR-T细胞的作用靶点。而分子生物学的基因编辑是其中十分重要的技术。那怎么才能做好基因编辑呢?
来!告诉你一个简单的套路!
请使用:
▶Thermo Scientific Heraeus Multifuge X1 & X3系列高性能通用台离式离心机
产品特点:
§ 卓越的离心力,丰富转头与适配器体现无以伦比离心灵活性,满足各种分子生物学各种基因编辑技术的需求
§ Clickseal第三方认证生物安全性密封盖,有效防止气溶胶的泄露
§ 较小的实验台面空间实现最大的离心通量,提高研究效率
§ Auto-LockIII转头自锁系统,一键三秒换转头,实现一机多用
§ Fiberlite 碳纤维转头,重量轻耐腐蚀硬度大,提供15年质保
还有!
▼
▶Thermo ScientificSorvallWX+ 系列超速离心机
§ 最大离心力达802,000 xg,满足细胞治疗中慢病毒包装纯化实验需要
§ 多样的转头选择,满足您实验室离心各种应用的需要
§ Auto-LockIII转头自锁系统,一键三秒转头
§ 第三方认证ClickSeal生物安全性密封技术
§ 永不疲劳的Fiberlite转头,重量轻,硬度大,耐腐蚀,提供15年质保