北京大学第一医院及湖北省武汉市儿童医院相关研究人员于今年上半年在Journal of Advanced Research（IF: 10.5）发表题为“persulfidation of transcription factor FOXO1 at cysteine 457: A novel mechanism by which H2S inhibits vascular smooth muscle cell proliferation”的研究论文，揭示了硫化氢（hydrogen sulfide, H2S）抑制血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell, VSMC）增殖的新机制，发现H2S通过过硫化修饰FOXO1第457位半胱氨酸抑制VSMC增殖。研究结果不仅深化了H2S在心血管稳态调节调控中的重要意义，更重要的是为高血压或动脉粥样硬化等血管损伤性疾病的抗血管重构治疗策略提供了新的研究思路及靶点。北京大学第一医院儿科田小雨博士和湖北省武汉市儿童医院周丹、张勇医师为本文共同第一作者，北京大学第一医院儿科杜军保教授、金红芳教授和黄娅茜副教授为本文共同通讯作者。

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VSMC异常增殖参与多种血管损伤性疾病的发病机制，既往研究表明H2S可以通过化学修饰相应靶蛋白，发挥抑制细胞增殖的作用，但H2S抑制VSMC增殖的机制尚未完全阐明。既往研究报道叉头框转录因子（forkhead box1, FOXO1）可以参与细胞增殖调控，课题组前期研究发现，H2S通过抑制FOXO1磷酸化失活发挥舒张血管的效应。在本研究中，研究人员以大鼠胸主动脉VSMC（A7r5）为研究对象，以FOXO1为靶点，探索H2S抑制VSMC增殖的分子机制，以期为高血压和动脉粥样硬化等血管损伤性疾病提供新的治疗靶点。

内源性硫化氢抑制血管平滑肌细胞增殖的过硫化修饰机制的示意图

为了阐明内源性H2S对血管平滑肌细胞的调控机制，研究发现，H2S可以通过FOXO1抑制内皮素-1（endothelin-1, ET-1）诱导的细胞增殖，即当给予ET-1促进细胞增殖后，再给予H2S的供体NaHS能够阻断ET-1所致的磷酸化FOXO1水平的增加，抑制FOXO1由核向胞浆内转移，显著抑制细胞增殖。

该研究通过对不同物种FOXO1序列比对分析发现，FOXO1分子的第457位半胱氨酸（cysteine 457, Cys457）在不同物种间高度保守，Cys457位点位于FOXO1的转录激活区（421-655aa），同时Cys457也位于与Nemo样激酶（NLK）相互作用的FOXO1功能域（283-563aa）。上述研究表明，Cys457是调控FOXO1活性的重要位点。为了揭示Cys457是否为H2S对FOXO1过硫化修饰的位点及其病理生理意义，研究结果显示，在转染野生型FOXO1质粒的VSMC和293T细胞中，H2S显著增加FOXO1的过硫化修饰，在转染C457S（FOXO1第457位半胱氨酸突变为丝氨酸）FOXO1质粒的VSMC和293T细胞中，H2S不能再对FOXO1蛋白产生过硫化修饰效应；H2S能抑制转染野生型FOXO1质粒的VSMC中ET-1诱导的FOXO1磷酸化和出核及细胞增殖的效应，但不能抑制转染FOXO1 C457S突变质粒的细胞中ET-1的上述效应。上述结果提示，H2S对FOXO1的Cys457过硫化修饰可能介导其复活FOXO1转录活性，抑制VSMC增殖效应。

综上所述，这项研究发现H2S通过过硫化修饰转录因子FOXO1第457位半胱氨酸，抑制FOXO1磷酸化依赖的FOXO1通路失活，阻断促增殖因子诱导的VSMC增殖。揭示了气体信号分子H2S抑制VSMC增殖的蛋白翻译后修饰新机制。研究结果不仅深化了H2S抑制VSMC增殖的机制，同时为高血压、肺动脉高压、动脉粥样硬化等血管损伤性疾病的预防和临床治疗提供了新思路。