慢病毒是一种成熟、优秀的外源基因导入的方法,广泛应用于构建稳转细胞株、RNA干扰细胞株、细胞永生化等实验。慢病毒包装时包装细胞将病毒颗粒释放到细胞上清液中,形成病毒悬液。该病毒悬液可以直接用于感染细胞。

在一些特殊情况下,例如需要表达的基因较大、有一定细胞毒性等,病毒产生滴度会很低,以至于不能达到转染细胞的要求。一些转染效率极低的细胞株也需要极高的病毒滴度才能转染。

慢病毒容易失活,病毒颗粒极小,浓缩纯化一般采用高速长时间离心的方法,但是该方法有耗时长,对设备要求高,需要病毒量大等缺点,难以常规使用。

北京英茂盛业研发的pEG慢病毒纯化试剂是使用pEG沉淀法收集浓缩病毒培养上清。慢病毒纯化可仅需4步,无需高速离心机等昂贵设备就能完成纯化。病毒回收效率大于90%。慢病毒浓缩纯化可以对于Cas9表达病毒、有毒蛋白的表达病毒等包装滴度低的病毒进行高效浓缩,达到转染细胞要求。也可以提高病毒滴度,实现对难转染细胞的转染。

该试剂使用简便,病毒悬液体积低至1-2ml也能方便地浓缩纯化。在纯化过程中能较好地保持病毒活力。

产品优点:

▪纯化病毒仅需2小时
▪无需高速离心机
▪浓缩高达20倍
▪回收率>90%
▪操作灵活方便


图1、操作步骤


图2、EGFp融合蛋白表达慢病毒转染SH-SY5Y细胞。A纯化前病毒悬液。B纯化浓缩20倍病毒。

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