众所周知,色谱系统是一种十分精密的设备,对结果的准确性要求也很高,因此,我们在样品制备的每一步都不可掉以轻心。正如液相色谱系统的说明书中所要求的,流动相必须使用HpLC级的试剂,且使用前必须过滤。

为什么要过滤?

流动相过滤可以保护色谱系统和色谱柱,延长柱子的使用寿命,并改善数据的精确度。同时,过滤也能够去除流动相中的颗粒杂质,避免它们对内部密封圈造成损害,或堵塞小孔管道、层析柱、线内过滤器及保护柱。

过滤用什么?

一般建议使用专门的过滤器。也许有人认为,过滤装置貌似挺贵,算了,买个砂芯漏斗得了。哎,同学,这么贵的房子都买了,还在乎一把锁?

使用专门的流动相过滤器,不仅简单,而且安全,比如pall公司的SolVac流动相过滤器。它采用聚丙烯外壳,耐受强酸、强碱、强腐蚀性有机溶剂。而磁性密封无需手动拧紧,不必担心漏液,也避免了膜移动或撕裂的可能性。它适合HpLC瓶、烧瓶和容器,让你不再需要来回倾倒溶液。与玻璃漏斗或一次性杯子相比,腐蚀性溶剂溢洒的可能性要小。当然,老板再也不担心我打碎漏斗了。

如何过滤?

SolVac流动相过滤器的使用十分简单,你只要按照下图的说明,依次放置好滤器和管线,再启动真空泵即可开始过滤。

在操作过程中,有一点需要特别注意,必须用干燥的过滤膜和干燥的支撑底座进行过滤,以防止空气在膜上形成气阻,这个阻力可使液体流速下降或阻止液体流出。在将过滤膜放在滤器上之前,须确保滤器是清洁、干燥的。

操作Q&A

原理我都懂,但是在实际的操作过程中,总是会出现这样或那样的问题。别着急!我们为你准备了一份操作秘籍,帮你排忧解难。

Q:为什么SolVac停止过滤了?

A:如果SolVac过滤器在开始流动后其过滤活动停止,可以从三个方面找原因。

•检查供给管道内有无造成空气闭塞的空气。如果管道内进了空气,那么你必须关闭真空装置,拿开湿的过滤膜,干燥过滤器,清理进口管道并在滤器上放上干燥的过滤膜,然后重新开始过滤。记住,供给管沉子须始终处于溶剂表面下方以防止空气进入管道形成空气堵塞。
•检查真空装置是否密封良好。牢固地将SolVac 过滤器夹持到接收容器上,直至再次形成良好的密封。如有必要,应增加真空压力以形成最佳密封。
•如果SolVac 过滤器已经牢固地密封在接收容器上而液流逐渐变小,那么你的过滤膜上可能附有微粒。更换一下过滤膜试试看。

Q:为什么SolVac在接收容器上不能密封?

A:将SolVac牢固地夹持到接收容器上,直至排尽空气且流动良好。如果容器较大,则排尽容器内的空气并形成良好真空所花的时间将会稍长。如有必要,可增加真空压力。建议使用 > 20英寸Hg的真空压力。常规的实验室真空泵,如pall Gelman Sciences Little Giant真空泵就是SolVac过滤器的理想配套设备。pall建议使用Vacushild空气过滤器,以避免阀门和泵元件受到液体损害。

Q:我在使用疏水过滤膜如pTFE时难以过滤甲醇、异丙醇或乙腈?

A:大多数pTFE过滤膜都有增加强度的支撑层。由于过滤膜或介质表面的刚性而在SolVac过滤架中密封不佳,会导致流速减小。为了防止这种情况出现,在过滤架最后装配之前,需要在过滤膜的顶端防止密封垫圈。在过滤完成后,这些垫圈可以保留,以便将来使用。

Q:我把系统安装好之后发现溶液并没有过滤?

A:如果你使用的是亲水过滤膜,需要注意,一旦过滤膜被含水溶液打湿,它就会防止空气透过。因此,沉子必须置于过滤储液罐的底部,这样能减少空气进入过滤器的可能性。这一点十分关键。

Q:SolVac的使用寿命有多长?

A:与玻璃漏斗和烧杯相比,SolVac的使用寿命更长。耐用的塑料结构能够承受粗暴的夹持,也可以避免玻璃器皿破裂的意外发生。如此看来,SolVac比传统的玻璃过滤系统更安全,也更经济。

Q:我的混合流动相要使用什么滤膜?

A:这个困惑许多人都有。若待过滤的液体与过滤器存在化学不兼容,则可能导致过滤失败。建议你在对任何样品/试剂进行过滤时,查一查pall的化学兼容性表。另外,pall也推出了GHp万能膜,有效解决了水相/有机相的疑问。

如果你对流动相过滤还有其他疑问,也欢迎提出,pall的专家将为你解答。

(生物通 余亮)